کشت آزمایشگاهی سلول‌های بنیادی لیمبال: بهره‌گیری از سلول‌های بنیادی سوماتیک خون بندناف به عنوان لایه حمایت کننده از سلول‌های بنیادی لیمبال

هدف: معرفی لایه تغذیه‌کننده نوینی با منشا انسانی به منظور تسهیل کشت سلول‌های بنیادی. روش پژوهش: سلول‌های بنیادی سوماتیک خون بندناف از مادران با دوران کامل بارداری جداسازی شد. بیان نشانگرهای سطحی سلول بنیادی نظیر CD105,CD90, CD73, CD44,CD34,CD45 با روش فلوسیتومتری بررسی شدند. سلول‌های بنیادی لیمبال بر روی دو لایه تغذیه کننده که با میتومایسین C فعالیت میتوزی آن‌ها متوقف شده بود، کشت یافته و با استفاده از میکروسکوپ، مرحله کنتراست مورفولوژی سلول‌های بنیادی لیمبال مورد ارزیابی قرار گرفت. بیان نشانگرهای اختصاصی سلول بنیادی لیمبال:19, KRT3P63, ABCG2,Involucrin, Vimentin,CX43, KRT با استفاده از روش ایمونوسیتوشیمی و Real-Time PCR بررسی شد. کروموزوم‌ها نیز پس از همجواری مورد ارزیابی کاریوتایپ قرار گرفتند. یافته‌ها: سلول‌های بنیادی سوماتیک خون بندناف دارای شکل دوکی با سرعت تقسیم بالا می‌باشند. بیان نشانگرهای سطحی بنیادی در آن‌ها مثبت بوده و نتایج نشان داد که سلول‌های بنیادی لیمبال کشت یافته بر سطح USSC دارای بیان مثبت برای P63ABCG2, KRT19،Involucrin, Vimentin, می‌باشند که با Real-Time PCR نیز مورد تایید قرار گرفت. نتایج بیان در گروه لایه تغذیه‌کننده 3T3 و USSC با یکدیگر مشابه بودند. نتایج کاریوتایپ نیز پس از گذشت 10 پاساژ متوالی، 44XX را نشان داد. نتیجه‌گیری: سلول‌های بنیادی مشتق از خون بندناف توانستند حمایت از سلول‌های بنیادی لیمبال را بطور کامل و حتی مناسب‌تر از رده سلولی 3T3 انجام دهند. از این جهت که سلول‌های لایه تغذیه کننده USSC منشا انسانی دارد، دارای مزیت عمده نسبت به 3T3 می‌باشند. · مجله چشم‌پزشکی بینا 1393؛ دوره 19، شماره 4: 351-337.